熒光顯微鏡的使用方法

熒光顯微鏡用于研究細胞內物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線(xiàn)照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線(xiàn)照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。  

它是以紫外線(xiàn)為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀(guān)察物體的形狀及其所在位置。用于研究細胞內物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線(xiàn)照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線(xiàn)照射亦可發(fā)熒光，就是對這類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。  

反光鏡的反光層一般是鍍鋁的，因為鋁對紫外光和可見(jiàn)光的藍紫區吸收少，反射達90%以上，而銀的反射只有70%;一般使用平面反光鏡。  

專(zhuān)為熒光顯微鏡設計制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成，分明視野聚光器和暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。  

下面要為您介紹的是使用時(shí)可采用的方法：  

1、采用反射激發(fā)時(shí)，先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組，把照明可變孔徑光闌與視場(chǎng)光闌*打開(kāi)，調節光源位置，使照明光束通過(guò)物鏡轉換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上，此時(shí)物鏡螺孔應是通孔(不裝物鏡)。檢查激發(fā)光束是否通過(guò)物鏡螺孔中央，可在螺孔端面上放置半透明紙觀(guān)察光源光斑是否居中，在某些顯微鏡中，光源是在垂直面內調節其上下左右位置，而光源成象是通過(guò)集光鏡沿軸方向移動(dòng)來(lái)達到的。  

2、采用透射激發(fā)時(shí)，可以使用蘭色光線(xiàn)根據普通明場(chǎng)照明法進(jìn)行照明系統的調節，這包括光源調節及聚光鏡中心的調節。如果采用暗場(chǎng)聚光鏡，則還需要注意暗場(chǎng)聚光鏡的使用及調節方法，當用蘭色光線(xiàn)調節好后，就可采用更換濾色片的方法，使標本得到所需要的激發(fā)光線(xiàn)照射標本，但要注意使遏止濾光片已在光路中，這樣可以保護觀(guān)察者眼睛免受紫外線(xiàn)損傷。  

希望上述內容能夠幫助大家更好的了解熒光顯微鏡。